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N310凱氏定氮儀-食品中的蛋白質

2022.04.25

食品中蛋白質營養對人體健康非常重要，人通過吸收蛋白質補充營養能量，蛋白質為復雜的含氮有機化合物，是各種氨基酸以肽鍵連接而成，各類食品的蛋白質含量很不均勻，蛋白質含量是評價食物營養價值的重要指標之一。但如過量攝入蛋白質則會對人體造成傷害，損害身體功能。本文章主要采用食品消解儀、自動凱氏定氮儀測定食品中的蛋白質總含量。與經典凱氏法比較，測定結果令人滿意，且該方法快速、準確。

N310凱氏定氮儀-食品中的蛋白質

在食品中蛋白質含量測定方法中常用基本的方法是凱氏定氮法并且采用經典的凱氏定氮法比較費時費力，要求實驗人員操作能力高，還需要人員時時觀察實驗。以下實驗采用食品消解儀、自動凱氏定氮儀組合測定食品中的蛋白質，該方法比經典法快速，解放人力、節省時間且數據準確可靠。


實驗方法

一、主要儀器

N310自動凱氏定氮儀（免水冷卻，格丹納公司）及排廢裝置；

DS-360-42H石墨消解儀（食品專用，格丹納公司）；

DS-360-42H石墨消解儀

電子天平(準確至0.0001克)。


二、主要試劑

濃硫酸；硫酸鉀；硫酸銅；鹽酸標準溶液0.1027mol／mL；氫氧化鈉溶液400g／L；1溴甲酚綠和0.7％甲基紅混合指示劑；1硼酸吸收溶液；硫酸銨；蔗糖。所用試劑均為優質品。


三、測定方法

稱取適量樣品放入石墨消解儀的消解管中，加入0.2g硫酸銅，6g硫酸鉀及約12mL濃硫酸手動慢慢搖均勻將樣品然后浸濕。把消解儀放入已預熱至42℃的石墨消解儀中，約60min樣品消化至透明藍綠色液體，取出冷卻至室溫。將消解管放入N310自動凱氏定氮儀加熱室中，關上安全門，設置程序啟動開始工作。


DS-360-42H石墨消解儀


四、精密度

取3種蛋白質含量不同的樣品，每種樣品平行測定6次，從測定結果可見，用該儀器的精密度良好，實驗結果如下所示。


精密度



五、回收率

準確度做數次氮回收率測定，檢驗操作過程和設備的準確性。用0.12硫酸銨和0.67g蔗糖的取樣量，按樣品準備步驟加入所有其他試劑，和樣品分析一樣的方法消化和蒸餾。結果見下表。

回收率

從表中可知平均回收率達99.5%。


六、實驗結論

采用智能石墨消解儀預消解大大地縮短消化時間，節約酸的用量，程序控溫消解操作簡便；用N310自動定氮儀測定食品中蛋白質，結果令人滿意，且大大提高了分析速度。


七、注意事項

(1)消化時應注意，樣品消化液必須含有過量的硫酸，以防止氨的損失。

(2)消化時間要掌握好，時間過長會引起氨的損失；消化時間不夠，消化不完全也會導致總氮量偏低。

(3)對于高脂肪的物質(脂肪>10)，所需酸的量要多2～3毫升，消化時間也相應長一些；或加入酸后，隔夜再消化。如果冒泡成問題，可以緩慢地加入3mL 3O～35過氧化氫來減少冒泡，待過氧化氫反應后才能進行下一步操作。


八、定氮儀相關資訊

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